ਪੌਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਲਈ ਸਾਵਧਾਨੀਆਂ

· polyacrylamideਜੈੱਲ ਨੂੰ ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਮੋਨੋਮਰ, ਪੌਲੀਮੇਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਵਾਲੀ ਸਮੱਗਰੀ, ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ, ਅਤੇ ਲੂਣ ਅਤੇ ਬਫਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਸੱਜੇ ਪਾਸੇ ਇਕੱਠੇ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

· acrylamideਅਤੇ BIS (N, N' - ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਡਬਲ ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ) ਮੋਨੋਮਰ ਫਾਰਮ ਜੈੱਲ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ ਹੈ।

· ਅਮੋਨੀਅਮ ਪਰਸਲਫੇਟ ਚਿਪਕਣ ਵਾਲੀ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ 10% ਅਮੋਨੀਅਮ ਪਰਸਲਫੇਟ ਘੋਲ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਜਾਣਕਾਰੀ ਸਰਗਰਮ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਲੋੜ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, 10% ਘੋਲ ਨੂੰ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਨੁਕਸਾਨ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਕਈ ਹਫ਼ਤਿਆਂ ਲਈ 4℃ 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। 10 ਮਿ.ਲੀ. ਤੱਕ ਬਣਾਉ ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਗੂੰਦ ਇਕੱਠਾ ਨਾ ਹੋ ਜਾਵੇ ਤਾਂ ਰੱਦ ਕਰ ਦਿਓ।

ਸੰਕੇਤ: ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾacrylamideਕ੍ਰਮਬੱਧ ਗੂੰਦ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਗੂੰਦ ਵਿੱਚ ਸਮਾਨ ਨਹੀਂ ਹੈ। ਜੇਕਰ ਪ੍ਰੀਮੇਡ ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ: BIS ਘੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰ ਰਹੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਸਹੀ ਬੋਤਲ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨਾ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ।

· TEMED (N, N, N ', N' - tetramethyl ethylenediamine) ਇੱਕ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਹੈ, ਇੱਕ ਭੂਰੀ ਬੋਤਲ ਵਿੱਚ, ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਗੂੰਦ ਪਾਉਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ.

· ਪੋਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸ਼ੀਸ਼ੇ ਨੂੰ ਹਰ ਵਾਰ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਧੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਗਰਮ ਸਾਬਣ ਵਾਲੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਨਰਮ ਬੁਰਸ਼ ਅਤੇ ਕੱਪੜੇ ਨਾਲ ਧੋਵੋ, ਡਿਸਟਿਲ ਕੀਤੇ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਕੁਰਲੀ ਕਰੋ ਅਤੇ ਸੁੱਕਣ ਲਈ ਖੜ੍ਹੇ ਹੋਵੋ।

ਖੋਖਲੇ ਪੌਲੀਮਰ ਨਾਲ ਨਮੀ ਅਤੇ ਧੂੜ ਪੈਦਾ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਕੱਚ ਦੀ ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਗਲਾਸ ਕਲੀਨਰ ਨਾਲ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਨਰਮ ਬੁਰਸ਼ ਨਾਲ ਪੂੰਝੋ। ਡਿਸਟਿਲ ਕੀਤੇ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਧੋਵੋ ਅਤੇ ਕਾਗਜ਼ ਪੂੰਝ ਕੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੁਕਾਓ। ਕਾਗਜ਼ ਨਾਲ ਪੂੰਝਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ 70% ਈਥਾਨੌਲ ਨਾਲ ਕੁਰਲੀ ਕਰਨ ਨਾਲ ਸੁੱਕਣ ਨੂੰ ਸਾਫ ਅਤੇ ਤੇਜ਼ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਮਿਲਦੀ ਹੈ। ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ: BIS, ਪਾਣੀ, ਬਫਰ ਘੋਲ, ਅਮੋਨੀਅਮ ਪਰਸਲਫੇਟ, TEMED। ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਿਲਾਓ ਅਤੇ ਤੁਰੰਤ ਡੋਲ੍ਹ ਦਿਓ.

ਪੌਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਪੌਲੀਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਨੂੰ ਡੀਗੈਸ ਕਰਨਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਨਹੀਂ ਹੈ। (ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਨੂੰ ਬੁਲਬਲੇ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਵੈਕਿਊਮ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਸੀ ਕਿਉਂਕਿ ਆਕਸੀਜਨ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕਦੀ ਹੈ।)

ਹਰੀਜੱਟਲ ਗਲੂ ਪੁਆਇੰਟ ਨਮੂਨਾ ਸੁਝਾਅ।

· ਹੇਠਲੇ ਬਕਸੇ ਵਿੱਚ ਕਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ ਦਾ ਇੱਕ ਟੁਕੜਾ, ਕਾਲੇ ਬੈਕਗ੍ਰਾਉਂਡ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਨਮੂਨਾ ਮੋਰੀ ਨੂੰ ਹੋਰ ਸਪਸ਼ਟ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵੇਖਣ ਲਈ ਰੱਖੋ।
· ਗਲੂ ਟੈਂਕ ਭਰਿਆ ਬਫਰ, ਕੋਲੋਇਡ ਦੇ ਬਿਲਕੁਲ ਉੱਪਰ।
· ਜੇਕਰ ਕਿਨਾਰੇ 'ਤੇ ਰੌਸ਼ਨੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਚਾਲੂ ਕਰੋ, ਰੌਸ਼ਨੀ ਨੂੰ ਕੋਲੋਇਡ ਚਮਕਣ ਦਿਓ। ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਪਾਈਪੇਟ ਵਿੱਚ ਖਿੱਚੋ।
· ਆਟੋਮੈਟਿਕ ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਯੰਤਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ।
· 10-200 MU ਵਿੱਚ 1 ਤਰਲ ਮੂਵਿੰਗ ਪੁਆਇੰਟ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਬਿੰਦੂਆਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਬਹੁਤ ਛੋਟੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਛੇਕ (10μ1 ਤੋਂ ਘੱਟ) ਲਈ, ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਬੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਲੰਬਾ ਪਾਈਪੇਟ ਹੈੱਡ ਵਧੇਰੇ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਹੈ।

· ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਡੁਬੋਇਆ ਹੋਇਆ ਪਾਈਪਟਿੰਗ, ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਚਲਦੇ ਤਰਲ ਨੂੰ ਸਾਹ ਲੈਣਾ। ਨਮੂਨਾ ਗਲਿਸਰੀਨ ਨਾਲ ਚਿਪਕਿਆ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਤੇਜ਼ ਪੰਪਿੰਗ ਪਾਈਪੇਟ ਦੇ ਸਿਰ ਵਿੱਚ ਹਵਾ ਦੇ ਬੁਲਬੁਲੇ ਖਿੱਚ ਸਕਦੀ ਹੈ।

· ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਸਿਰ ਨੂੰ ਸਾਹ ਲੈਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਨਮੂਨੇ, ਤਰਲ ਸਿਰ ਨੂੰ ਪਾਈਪ ਦੇ ਕਿਨਾਰੇ 'ਤੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਹਿਲਾਉਣਗੇ ਜਾਂ ਕਾਗਜ਼ ਪੂੰਝਣ ਨਾਲ ਤਰਲ ਸਿਰ ਨੂੰ ਬੂੰਦਾਂ ਦੇ ਬਾਹਰ ਚੂਸਿਆ ਜਾਵੇਗਾ। ਸਾਵਧਾਨ ਰਹੋ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਚੂਸ ਨਾ ਕਰੋ.

ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ

· ਥੋੜਾ ਜਿਹਾ ਦਬਾਅ ਰੱਖਣ ਲਈ ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਡਿਵਾਈਸ, ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਓਵਰਫਲੋ ਤਰਲ ਸਿਰ ਨੂੰ ਥੋੜ੍ਹਾ ਹਿਲਾਓ।
· ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਹੈਡ ਨੂੰ ਬਫਰ ਵਿੱਚ ਪਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਸਪਾਟ ਹੋਲ ਤੋਂ ਥੋੜ੍ਹਾ ਉੱਚਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਦਬਾਅ ਬਣਾਈ ਰੱਖਦਾ ਹੈ। ਪਾਈਪੇਟ ਦੀ ਨੋਕ ਨੂੰ ਇੱਕ ਛੋਟੇ ਮੋਰੀ ਵਿੱਚ ਪਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ.
· ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਅਤੇ ਲਗਾਤਾਰ ਨਮੂਨੇ ਬਾਹਰ ਨਿਕਲਦੇ ਹਨ। ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪ ਨੂੰ ਪੁਆਇੰਟ ਸੈਂਪਲ ਹੋਲ ਦੇ ਉੱਪਰ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਮੋਰੀ ਵਿੱਚ ਡੁੱਬ ਜਾਵੇਗਾ। ਅੰਦਰ ਧੱਕਣ ਦੀ ਬਜਾਏ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਨੂੰ ਭਰਨ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਡੁੱਬਣ ਦਿਓ।
· ਇੱਕ ਵਾਰ ਤਰਲ ਸਿਰ ਦੇ ਨਾਲ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਆਖਰੀ ਬੂੰਦ, ਤਰਲ ਦੂਜੀ ਲੱਤ ਵਿੱਚ ਚਲੇ ਜਾਵੇਗਾ, ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਤਰਲ ਮੂਵ ਨੂੰ ਵਧਾਓ, ਬਫਰ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਚਲੇ ਜਾਓ

ਲੰਬਕਾਰੀ ਗੂੰਦ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਕਿਵੇਂ ਕਰਨਾ ਹੈ?

· ਸ਼ੀਸ਼ੇ ਦੇ ਦੋ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਬਣੇ ਲੰਬਕਾਰੀ ਗਲੂ ਪੁਆਇੰਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਛੇਕ। ਬਹੁਤ ਪਤਲੇ ਗੂੰਦ ਵਿੱਚ, ਪਾਈਪੇਟ ਸਿਰ ਨੂੰ ਦੋ ਕੱਚ ਦੀਆਂ ਪਲੇਟਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਵੀ ਨਹੀਂ ਪਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਗਲੀਸਰੀਨ ਦੇਖੋ! ਪਾਈਪੇਟ ਦੇ ਸਿਰ ਨੂੰ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਉੱਤੇ ਰੱਖੋ ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਮੋਰੀ ਵਿੱਚ ਡੁੱਬ ਜਾਵੇਗਾ।
· ਪੁਆਇੰਟ ਨਮੂਨੇ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਪੌਲੀਪ੍ਰੋਪਾਈਲੀਨ ਐਸਿਲ ਜੈੱਲ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਦੇ ਲੰਬਕਾਰੀ ਬਿੰਦੂ ਨੂੰ ਸਾਫ਼ ਕਰਨਾ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ। ਗੈਰ-ਪੌਲੀਮਰਾਈਜ਼ਡ ਐਕਰੀਲਾਮਾਈਡ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਨੂੰ ਧੋਵੋ ਜੋ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਪਾਣੀ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਨੂੰ ਕਾਫ਼ੀ ਛੋਟਾ ਬਣਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ 25ml ਜਾਂ 50ml ਸਰਿੰਜ ਅਤੇ ਇੱਕ 18-ਗੇਜ ਸੂਈ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਬਫਰ ਵਿੱਚ ਡੋਲ੍ਹ ਦਿਓ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਫਲੱਸ਼ ਕਰੋ।
· ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਮੋਰੀ ਨੂੰ ਵੇਖਣਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਸਦੇ ਨਾਲ ਹੀ, ਬਾਕੀ ਆਸਾਨ ਹੈ। ਜੇਕਰ ਵਾਧੂ ਛੇਕ ਹਨ, ਤਾਂ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਬਫਰ ਨੂੰ ਬਰੋਮੋਫੇਨੋਲ ਨੀਲੇ ਨਾਲ ਟੈਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।